對畜禽行業來說,白血病的(de)爆發(fā)不啻於一場“浩劫”:我國花巨資購入的艾維因品(pǐn)係白羽肉種雞此前本已實現了(le)自繁自養,但因(yīn)感染禽白血病而完全退出市場,從此完全依賴進口;更嚴重的是,國內自繁自養的蛋雞(jī)、黃羽肉雞等原種雞群也大批量感染了禽白血病;甚至在發病高峰期,每年至少有6千萬隻商品代蛋雞(jī)死亡,涉及國內三分之二種雞公司的後代(dài),年損失約45億元(yuán)。
形勢逆轉是從一種被稱為“克星”的新技術開始的。科(kē)技日報記者近(jìn)日走入河北大午農(nóng)牧集團種禽有(yǒu)限公司雞舍,和總經理劉平聊起了這個企業與禽白血病的“戰鬥”過程。“現在有了禽白血病診(zhěn)斷和(hé)淨化技術,禽白血病病毒在經營的蛋雞原種雞群(qún)中實現了徹底淨化,再也(yě)不用擔驚受怕了。”劉平開心地說。
這(zhè)項由山東農業大學(xué)自主研發的禽白(bái)血病診斷和淨化技術,現已應用於眾多養殖企業,從源頭切斷(duàn)了疾病的(de)傳(chuán)播。目前,該(gāi)診斷檢測技術(shù)被中國農業大學、中國農科院、農業部獸醫診斷中心等從事禽白血病研究的(de)高校和科研機構采用,通過檢疫(yì)切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推(tuī)廣應用,取得了巨大的經濟社會效益。
找(zhǎo)出發病“元凶”
“美國多年前已經發現了禽白血病,我國的白羽(yǔ)肉雞幾乎都由(yóu)美國進口。當時我們就判斷,我(wǒ)國的白羽雞得(dé)的病可能就是禽(qín)白血病。”山東農業(yè)大學崔治中教授表示。
事實證明,崔(cuī)治中的推斷是正確的。崔治中團(tuán)隊在我國白(bái)羽肉雞中(zhōng)率先分離鑒定(dìng)了J亞群禽(qín)白(bái)血病病毒(以下簡稱J病毒),並找(zhǎo)到了有關基因組上可追溯來源的分子標誌,證實了該病毒來自美(měi)國。這也讓國(guó)內有關公司(sī)的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學依據。
經(jīng)過深入研究,團隊還發現J病毒(dú)是我國雞群白血病的主要病因。在發病嚴重的年份,我國所有(yǒu)白羽快大型肉雞群普遍(biàn)發生J病毒感染,並且約70%市場份額的蛋雞種業公司被投訴。
針對該病毒的(de)傳播原理,崔治中向記者科普道,橫向傳播,指病毒在人群中不同個體間的(de)傳播,在特定(dìng)條件下也(yě)可直接進入血循環;垂直傳播,指(zhǐ)通過胎*或產道,病毒直接由親代(dài)傳播給(gěi)子代的方式,“而禽白血病是由禽(qín)白血病病毒(ALV)引起的腫瘤(liú)病(bìng),以垂直傳播為主,但又能橫向傳播,也(yě)就是種雞感染禽白血病後(hòu)會傳給數量(liàng)巨大的商品(pǐn)代(dài)雛雞,又能在孵(fū)化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按(àn)照理(lǐ)論,一隻曾祖代雞能產出24萬隻商品雞,也就是如果一隻曾祖代種(zhǒng)雞(jī)感染,會造成數萬隻商品雞感染,經濟損失可想而知(zhī)。”麵對這一重疫病,崔治中和團隊人員憂心忡(chōng)忡。
為此,崔(cuī)治中團隊連續多年收集保存各亞群禽(qín)白(bái)血病病毒共200餘(yú)株,建立了係統完善的資源庫,由此也創新性地揭示了我國J病毒的分子演變規律,“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進口(kǒu)”
找到元(yuán)凶,下一步就是控製,但我(wǒ)國的曾祖代或(huò)者祖代種雞幾乎都從(cóng)國外進口,如何通過對進口種雞進行檢測以從源頭上(shàng)避免帶(dài)進J病毒?“在當時,全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試(shì)劑。”崔治中感歎道。
模擬抗原是(shì)*一道難關,正當團隊(duì)一籌莫展時,另(lìng)一種病毒吸引了科研人的視線。“當時昆蟲杆狀病毒表達係統剛剛興起,因為其(qí)所表達的蛋白含量高(gāo),且它作為真核表達係統(tǒng)能更(gèng)好的模(mó)擬抗(kàng)原。”崔治中說,通過該病毒表達係統為載體,很快表達出(chū)了J病毒的抗原蛋白,“緊接著,我們研製出了針(zhēn)對該病毒的單克隆抗體,並利用這一單克隆抗體在(zài)熒光顯微鏡下觀察到病毒的存(cún)在,建立了(le)可(kě)用於(yú)檢測J病毒(dú)的間接免疫熒光檢測方法。”
間接免疫熒光檢測(cè)方法現在是一種非常常規的檢測方法,“但當時在獸(shòu)醫學的應用較少。”團隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道,我們檢測時在所取樣(yàng)品中(zhōng)加入(rù)針對J病毒的單克隆抗體(tǐ),而(ér)這種抗體隻會與J病毒結合,然後再加(jiā)入熒光素標記物,如果抗體已與病毒結合(hé),則在專用熒光顯(xiǎn)微鏡(jìng)下就能(néng)看到病毒感染部位發出紅色或綠色的熒光,若沒有結合就不會看到光亮,由此判(pàn)定細胞中是否存在病毒感染。整個過(guò)程簡單、易操作(zuò)。
在實踐中,新的(de)診斷技術也讓國內(nèi)禽類企業如(rú)虎添翼的(de)同時,保證了雞禽的質量。
北京愛拔益加家禽育(yù)種有限公司等四家公司此前一直從國外進口AA、ROSS品係祖代肉雞種苗,在意識到了禽白血病病毒危害(hài)的嚴重性後,運用間接免疫熒光檢測方法,在堵住禽白血病(bìng)從國外到國內的“進口”的同時,這三家公司(sī)的種雞群很(hěn)快就實現了(le)禽(qín)白(bái)血病“零發生”。直到(dào)現在這些企業仍然是國內種禽行業的龍頭企業。
淨化國內“土著雞”
禽(qín)白血病“進口”堵住了。然而之前隨進口(kǒu)種雞帶入的該禽白血病病毒(dú),已傳進了我國幾乎所有自繁自養的蛋雞和黃羽肉(ròu)雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫(yì)苗情況下,如何在這些“土著”雞(jī)群中快速、徹底淨化禽白血病病(bìng)毒?
考慮到該病毒垂直傳播的特點,研究團隊打算通過對種雞群進行檢測(cè)後淘汰帶毒病雞的(de)方式進行淨化。然而,在(zài)家禽的哪個生長階段檢測(cè)?取雞體(tǐ)中的什(shí)麽樣品?這些又成為在研究中必(bì)須攻克(kè)的“山頭”。
適合我國原(yuán)種雞場的禽白血病淨化集成規程此時出現了,解決了(le)上述難題。該方法可在種(zhǒng)雞(jī)生長的幾個關(guān)鍵期(qī)進行(háng)病毒(dú)檢測後,徹底淘汰帶禽白(bái)血病病毒的雞。規程中的檢測樣品包括(kuò):在種(zhǒng)蛋孵化出殼時,技術人員采(cǎi)集所有雛雞胎糞;在育雛後期,采集所(suǒ)有雞的血液;在開產初期和留種前,采集所有雞的血液和公雞精液。
“由於種蛋(dàn)出殼時的雛雞*易感染病毒,病毒可能會橫向(xiàng)感染其他剛出殼的雛雞,想徹底清除病毒樣本必(bì)須檢測胎糞。”趙鵬表示,除此之(zhī)外,還因為“胎糞檢測結果不僅可以反映這隻雞(jī)的感染狀態,還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期,這個時期需要較高的溫度和營養,要飼養在專門的育雛舍(shě)中,應激反應越小越好。”
*後,為了防止漏檢,在(zài)種雞育雛後期由育雛舍轉入育成舍時還要檢測,不把病毒帶入新雞舍,在開產初期和留種前,也(yě)就是雞要(yào)“生孩子”時再進行*後把關。
打破誤區,做到“不留死角”
此前國際禽(qín)病界和(hé)家禽育種公司一直認為由於精子的自我校正(zhèng)機(jī)製等原因,禽(qín)白血病病(bìng)毒並(bìng)不感染精子,而公雞和(hé)母雞(jī)直接接觸才會傳染,認為在生產中普遍采用人工授精的方式,不會造成禽(qín)白血病的感染。“我們證明了種公雞可經精液將病毒傳染給母雞(jī),並由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說。
“在實施禽白血病淨化過程中發現,用(yòng)感(gǎn)染禽(qín)白血病的公雞精液為正常母雞人(rén)工授精後,其後代群體中(zhōng)仍有禽白血病感染現象的發生。”崔治中說,由此(cǐ)我們開始懷疑公(gōng)雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞?
一係列試驗立刻進行,通過給雞胚靜脈接種J病毒,待其孵化後找到感染病(bìng)毒的公雞,再等它們性成熟後采集精(jīng)液給母雞做人(rén)工授精,*後檢測(cè)母雞是否感染,並將該母雞產的蛋孵化小(xiǎo)雞,對其進行病毒分離,結果顯示,這種方式孵化出的小雞體內也可(kě)以檢(jiǎn)測出禽白血病病毒。“精液中的成分是很複雜的,精子隻是其中一小部分,精(jīng)子不感染病毒不代表精液中沒有病毒。”趙鵬表示(shì),試驗數(shù)據證實了他們的懷疑是正確的,並進一步挖掘出新的“真相”:公雞即使血液中沒(méi)有檢(jiǎn)測(cè)到禽白(bái)血(xuè)病病毒,但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公(gōng)雞精液實施病毒分離檢(jiǎn)測的*佳操作流程在眾多雞禽類企業試驗後,數據顯示雞群的禽白血病感染率進一步(bù)下降(jiàng)。
“過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播(bō)中的作用,漏檢了很(hěn)多帶病種公雞,所以西方國家需(xū)用7至10年(nián)甚至更長(zhǎng)的時間才能完成淨化。而運用了新(xīn)技術,隻需3至5年就能徹底淨化原種雞場內的禽白血病(bìng)毒。”趙鵬表示。
這也讓國內原種雞群禽白血病病毒淨化“不留死角”。
形勢逆轉是從一種被稱為“克星”的新技術開始的。科(kē)技日報記者近(jìn)日走入河北大午農(nóng)牧集團種禽有(yǒu)限公司雞舍,和總經理劉平聊起了這個企業與禽白血病的“戰鬥”過程。“現在有了禽白血病診(zhěn)斷和(hé)淨化技術,禽白血病病毒在經營的蛋雞原種雞群(qún)中實現了徹底淨化,再也(yě)不用擔驚受怕了。”劉平開心地說。
這(zhè)項由山東農業大學(xué)自主研發的禽白(bái)血病診斷和淨化技術,現已應用於眾多養殖企業,從源頭切斷(duàn)了疾病的(de)傳(chuán)播。目前,該(gāi)診斷檢測技術(shù)被中國農業大學、中國農科院、農業部獸醫診斷中心等從事禽白血病研究的(de)高校和科研機構采用,通過檢疫(yì)切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推(tuī)廣應用,取得了巨大的經濟社會效益。
找(zhǎo)出發病“元凶”
“美國多年前已經發現了禽白血病,我國的白羽(yǔ)肉雞幾乎都由(yóu)美國進口。當時我們就判斷,我(wǒ)國的白羽雞得(dé)的病可能就是禽(qín)白血病。”山東農業(yè)大學崔治中教授表示。
事實證明,崔(cuī)治中的推斷是正確的。崔治中團(tuán)隊在我國白(bái)羽肉雞中(zhōng)率先分離鑒定(dìng)了J亞群禽(qín)白(bái)血病病毒(以下簡稱J病毒),並找(zhǎo)到了有關基因組上可追溯來源的分子標誌,證實了該病毒來自美(měi)國。這也讓國(guó)內有關公司(sī)的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學依據。
經(jīng)過深入研究,團隊還發現J病毒(dú)是我國雞群白血病的主要病因。在發病嚴重的年份,我國所有(yǒu)白羽快大型肉雞群普遍(biàn)發生J病毒感染,並且約70%市場份額的蛋雞種業公司被投訴。
針對該病毒的(de)傳播原理,崔治中向記者科普道,橫向傳播,指病毒在人群中不同個體間的(de)傳播,在特定(dìng)條件下也(yě)可直接進入血循環;垂直傳播,指(zhǐ)通過胎*或產道,病毒直接由親代(dài)傳播給(gěi)子代的方式,“而禽白血病是由禽(qín)白血病病毒(ALV)引起的腫瘤(liú)病(bìng),以垂直傳播為主,但又能橫向傳播,也(yě)就是種雞感染禽白血病後(hòu)會傳給數量(liàng)巨大的商品(pǐn)代(dài)雛雞,又能在孵(fū)化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按(àn)照理(lǐ)論,一隻曾祖代雞能產出24萬隻商品雞,也就是如果一隻曾祖代種(zhǒng)雞(jī)感染,會造成數萬隻商品雞感染,經濟損失可想而知(zhī)。”麵對這一重疫病,崔治中和團隊人員憂心忡(chōng)忡。
為此,崔(cuī)治中團隊連續多年收集保存各亞群禽(qín)白(bái)血病病毒共200餘(yú)株,建立了係統完善的資源庫,由此也創新性地揭示了我國J病毒的分子演變規律,“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進口(kǒu)”
找到元(yuán)凶,下一步就是控製,但我(wǒ)國的曾祖代或(huò)者祖代種雞幾乎都從(cóng)國外進口,如何通過對進口種雞進行檢測以從源頭上(shàng)避免帶(dài)進J病毒?“在當時,全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試(shì)劑。”崔治中感歎道。
模擬抗原是(shì)*一道難關,正當團隊(duì)一籌莫展時,另(lìng)一種病毒吸引了科研人的視線。“當時昆蟲杆狀病毒表達係統剛剛興起,因為其(qí)所表達的蛋白含量高(gāo),且它作為真核表達係統(tǒng)能更(gèng)好的模(mó)擬抗(kàng)原。”崔治中說,通過該病毒表達係統為載體,很快表達出(chū)了J病毒的抗原蛋白,“緊接著,我們研製出了針(zhēn)對該病毒的單克隆抗體,並利用這一單克隆抗體在(zài)熒光顯微鏡下觀察到病毒的存(cún)在,建立了(le)可(kě)用於(yú)檢測J病毒(dú)的間接免疫熒光檢測方法。”
間接免疫熒光檢測(cè)方法現在是一種非常常規的檢測方法,“但當時在獸(shòu)醫學的應用較少。”團隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道,我們檢測時在所取樣(yàng)品中(zhōng)加入(rù)針對J病毒的單克隆抗體(tǐ),而(ér)這種抗體隻會與J病毒結合,然後再加(jiā)入熒光素標記物,如果抗體已與病毒結合(hé),則在專用熒光顯(xiǎn)微鏡(jìng)下就能(néng)看到病毒感染部位發出紅色或綠色的熒光,若沒有結合就不會看到光亮,由此判(pàn)定細胞中是否存在病毒感染。整個過(guò)程簡單、易操作(zuò)。
在實踐中,新的(de)診斷技術也讓國內(nèi)禽類企業如(rú)虎添翼的(de)同時,保證了雞禽的質量。
北京愛拔益加家禽育(yù)種有限公司等四家公司此前一直從國外進口AA、ROSS品係祖代肉雞種苗,在意識到了禽白血病病毒危害(hài)的嚴重性後,運用間接免疫熒光檢測方法,在堵住禽白血病(bìng)從國外到國內的“進口”的同時,這三家公司(sī)的種雞群很(hěn)快就實現了(le)禽(qín)白(bái)血病“零發生”。直到(dào)現在這些企業仍然是國內種禽行業的龍頭企業。
淨化國內“土著雞”
禽(qín)白血病“進口”堵住了。然而之前隨進口(kǒu)種雞帶入的該禽白血病病毒(dú),已傳進了我國幾乎所有自繁自養的蛋雞和黃羽肉(ròu)雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫(yì)苗情況下,如何在這些“土著”雞(jī)群中快速、徹底淨化禽白血病病(bìng)毒?
考慮到該病毒垂直傳播的特點,研究團隊打算通過對種雞群進行檢測(cè)後淘汰帶毒病雞的(de)方式進行淨化。然而,在(zài)家禽的哪個生長階段檢測(cè)?取雞體(tǐ)中的什(shí)麽樣品?這些又成為在研究中必(bì)須攻克(kè)的“山頭”。
適合我國原(yuán)種雞場的禽白血病淨化集成規程此時出現了,解決了(le)上述難題。該方法可在種(zhǒng)雞(jī)生長的幾個關(guān)鍵期(qī)進行(háng)病毒(dú)檢測後,徹底淘汰帶禽白(bái)血病病毒的雞。規程中的檢測樣品包括(kuò):在種(zhǒng)蛋孵化出殼時,技術人員采(cǎi)集所有雛雞胎糞;在育雛後期,采集所(suǒ)有雞的血液;在開產初期和留種前,采集所有雞的血液和公雞精液。
“由於種蛋(dàn)出殼時的雛雞*易感染病毒,病毒可能會橫向(xiàng)感染其他剛出殼的雛雞,想徹底清除病毒樣本必(bì)須檢測胎糞。”趙鵬表示,除此之(zhī)外,還因為“胎糞檢測結果不僅可以反映這隻雞(jī)的感染狀態,還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期,這個時期需要較高的溫度和營養,要飼養在專門的育雛舍(shě)中,應激反應越小越好。”
*後,為了防止漏檢,在(zài)種雞育雛後期由育雛舍轉入育成舍時還要檢測,不把病毒帶入新雞舍,在開產初期和留種前,也(yě)就是雞要(yào)“生孩子”時再進行*後把關。
打破誤區,做到“不留死角”
此前國際禽(qín)病界和(hé)家禽育種公司一直認為由於精子的自我校正(zhèng)機(jī)製等原因,禽(qín)白血病病(bìng)毒並(bìng)不感染精子,而公雞和(hé)母雞(jī)直接接觸才會傳染,認為在生產中普遍采用人工授精的方式,不會造成禽(qín)白血病的感染。“我們證明了種公雞可經精液將病毒傳染給母雞(jī),並由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說。
“在實施禽白血病淨化過程中發現,用(yòng)感(gǎn)染禽(qín)白血病的公雞精液為正常母雞人(rén)工授精後,其後代群體中(zhōng)仍有禽白血病感染現象的發生。”崔治中說,由此(cǐ)我們開始懷疑公(gōng)雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞?
一係列試驗立刻進行,通過給雞胚靜脈接種J病毒,待其孵化後找到感染病(bìng)毒的公雞,再等它們性成熟後采集精(jīng)液給母雞做人(rén)工授精,*後檢測(cè)母雞是否感染,並將該母雞產的蛋孵化小(xiǎo)雞,對其進行病毒分離,結果顯示,這種方式孵化出的小雞體內也可(kě)以檢(jiǎn)測出禽白血病病毒。“精液中的成分是很複雜的,精子隻是其中一小部分,精(jīng)子不感染病毒不代表精液中沒有病毒。”趙鵬表示(shì),試驗數(shù)據證實了他們的懷疑是正確的,並進一步挖掘出新的“真相”:公雞即使血液中沒(méi)有檢(jiǎn)測(cè)到禽白(bái)血(xuè)病病毒,但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公(gōng)雞精液實施病毒分離檢(jiǎn)測的*佳操作流程在眾多雞禽類企業試驗後,數據顯示雞群的禽白血病感染率進一步(bù)下降(jiàng)。
“過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播(bō)中的作用,漏檢了很(hěn)多帶病種公雞,所以西方國家需(xū)用7至10年(nián)甚至更長(zhǎng)的時間才能完成淨化。而運用了新(xīn)技術,隻需3至5年就能徹底淨化原種雞場內的禽白血病(bìng)毒。”趙鵬表示。
這也讓國內原種雞群禽白血病病毒淨化“不留死角”。
